🔬 LECTEUR DE MICROPLAQUES ELISA

🎯 Principe ELISA

La technique ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) combine la spécificité de la réaction antigène-anticorps avec la sensibilité d'une réaction enzymatique colorimétrique. L'enzyme liée à l'anticorps convertit un substrat incolore en produit coloré, proportionnellement à la quantité d'analyte.

🔬 Composants Lecteur

• Source lumineuse LED ou halogène
• Système optique à filtres
• Photomultiplicateur/photodiode
• Système de déplacement X-Y
• Interface informatique
• Logiciel d'analyse et calculs

⚗️ Enzymes Utilisées

• HRP (Peroxydase raifort) + TMB → bleu
• AP (Phosphatase alcaline) + pNPP → jaune
• β-galactosidase + ONPG → jaune
• Glucose oxydase + chromogène
• Substrats chimiluminescents possibles
• Solutions stop pour bloquer réaction

📊 Analyse des Résultats

• Lecture absorbance 450 nm (+ 620 nm)
• Courbe d'étalonnage (standard curve)
• Régression linéaire/log-log/4-paramètres
• Calcul concentrations inconnues
• Contrôles positifs et négatifs
• Validation critères acceptabilité

🛡️ Contrôle Qualité

• Calibration photométrique régulière
• Vérification linéarité
• Blanc réactif systématique
• Contrôles internes multi-niveaux
• CV intra et inter-essais < 10%
• Traçabilité température stockage

💡 Optimisations

• Blocking agents (BSA, lait) anti-bruit
• Température et temps standardisés
• Laveur automatique de microplaques
• Distributeur multicanaux répétabilité
• Logiciels validation automatique
• Format 96 puits (8×12) standard